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抗原制備時(shí)常用的方法、條件及制備方式

發(fā)表時(shí)間:2024-03-20 訪問次數(shù):1255

  無論是單克隆抗體制備還是多克隆抗體制備,抗原的設(shè)計(jì)都是最為重要的一個(gè)過程,只有設(shè)計(jì)出合理的抗原,才能更好地刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。那么,抗原制備需要具備哪些條件?具體制備方法有哪些?以及制備過程中的注意事項(xiàng)有哪些?下面,普健生物和大家具體聊聊。

單克隆抗體和多克隆抗體

  一個(gè)良好的抗原制備條件有哪些?

  1、分子足夠大。對(duì)于多肽或蛋白類抗原來說,其抗原決定簇直接關(guān)注到其抗體的產(chǎn)生。但是,對(duì)于抗原決定簇來說,其通常由6-8個(gè)氨基酸殘基組成,所以,只有分子量足夠大的抗體才能承載得上;

  2、外源性強(qiáng)。所選抗體盡量和免疫機(jī)體異源性高,這樣才能更好的刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體;

  3、結(jié)構(gòu)更復(fù)雜。一般來說,簡(jiǎn)單的物質(zhì)不具備免疫原性,只有結(jié)構(gòu)足夠復(fù)雜,才能在更大程度上刺激免疫反應(yīng)的發(fā)生;

  4、可降解性好。作為抗原,必須是可降解的,否則,很容易對(duì)機(jī)體造成不可挽回的影響;

  常用的抗原制備方法有哪些?

  1、高純度的天然蛋白。一般來說,蛋白存在翻譯后修飾,其結(jié)構(gòu)復(fù)雜度也是非常高的,所以,天然蛋白就是很好的抗原,只是需要做好純化操作;

  2、高純度的重組蛋白。天然蛋白既然可以用作抗原,重組蛋白自然也可以。而且生產(chǎn)過程更容易掌控,也可以根據(jù)需求進(jìn)行設(shè)計(jì),當(dāng)然了,純化依然是必不可少的一個(gè)方面;

  3、人工合成的多肽。合成的多肽也能在 一定程度上影響到機(jī)體,使得其產(chǎn)生免疫反應(yīng)。但是,一般來說多肽的分子量都較小,需要將多肽連到一個(gè)較大載體來增加其免疫原性;

  抗原設(shè)計(jì)時(shí)需要注意的問題有哪些?

  1、序列的外源性。設(shè)計(jì)出的序列不能和動(dòng)物體內(nèi)的序列相同,否則很難產(chǎn)生免疫反應(yīng);

  2、蛋白的親疏水性。對(duì)于蛋白來說,親水端一般顯露在外,而疏水端則隱藏在內(nèi)部,所以,設(shè)計(jì)的片段盡量選擇親水;

  3、N端與C端的選擇。對(duì)于抗原來說,末端肽段效果要優(yōu)于中間段肽段;

  4、多肽的長(zhǎng)度。一般來說,一個(gè)抗原決定簇由6-8個(gè)氨基酸組成,所以,多肽的長(zhǎng)度不能少于6個(gè)氨基酸;

  無論對(duì)于抗原還是抗體來說,都需要保持其高純度。純度越高,其可能產(chǎn)生的非目的性免疫反應(yīng)就會(huì)越小,目的蛋白的比重就會(huì)越高。當(dāng)然了,作為抗原,不能有太大的毒性,既要讓機(jī)體產(chǎn)生免疫原性,又要不對(duì)機(jī)體造成太大影響。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供抗原制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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