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噬菌體展示技術(shù)-讓你一文讀懂噬菌體

發(fā)表時(shí)間:2022-08-18 訪問次數(shù):1280

  噬菌體展示技術(shù)是一種基于定向化技術(shù)的高通量篩選技術(shù),它能在極大程度上定向技術(shù)在抗體多肽的改造和篩選方面的應(yīng)用,實(shí)現(xiàn)外源肽或蛋白基因與噬菌體上特定蛋白融合表達(dá)的新技術(shù)。隨著噬菌體展示技術(shù)的不斷發(fā)展,其優(yōu)勢(shì)得到了廣泛的認(rèn)知,在實(shí)驗(yàn)室中的使用也愈發(fā)的頻繁。

  那么,什么是噬菌體展示技術(shù)呢?

  就理論而言,噬菌體展示相對(duì)來說非常的簡單,就是通過將外源肽段和噬菌體的衣殼蛋白融合展示與噬菌體表面,然后通過篩選及富集等一系列的技術(shù),提取出我們所需要的蛋白產(chǎn)品。而且噬菌體展示技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)人和其他動(dòng)物的B細(xì)胞抗體庫進(jìn)行體外篩選,能夠很好地避開免疫和細(xì)胞融合等步驟,在極大程度上縮短了實(shí)驗(yàn)的周期,并且增加了其穩(wěn)定性。因?yàn)槭删w展示技術(shù)具備篩選容量大、可發(fā)酵生產(chǎn)、操作簡單等一系列的優(yōu)勢(shì),使得它在之后的使用中變得越發(fā)的廣泛。

  噬菌體展示技術(shù)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在哪些方面?

  1、固相和液相噬菌體展示文庫篩選經(jīng)驗(yàn)豐富,可自動(dòng)化進(jìn)行噬菌體展示高通量篩選,實(shí)現(xiàn)快速交付;

  2、高達(dá)1010以上的天然抗體文庫庫容以及107以上的免疫抗體文庫庫容;

  3、通過先進(jìn)的親和力檢測(cè)技術(shù),可以深入地檢測(cè)其生物信息,從而選擇出最佳的人源框架區(qū)序列,快速且高通量地篩選出高親和力、高產(chǎn)量的人源化抗體

  4、片段插入率高,可達(dá)90%以上;

  噬菌體抗體庫構(gòu)建:

  1、噬菌體展示技術(shù)的使用流程

  2、隨機(jī)多肽/蛋白多肽核酸序列合成

  3、組織RNA抽提及cDNA制備目的基因/抗體基因克隆基因插入載體電轉(zhuǎn)大腸桿菌抗體庫庫容及多樣性檢測(cè)

  抗體庫篩選:

  靶分子暴露靶分子與噬菌體結(jié)合洗脫擴(kuò)增得到篩選到的基因及表達(dá)產(chǎn)物。

  總的來說,噬菌體展示技術(shù)能夠帶來很多傳統(tǒng)蛋白表達(dá)方式所無法達(dá)到的效果,而且因?yàn)槠鋬?yōu)勢(shì),使得其在生產(chǎn)一些蛋白的時(shí)候,能減少中間過程,降低其生產(chǎn)周期。隨著噬菌體展示技術(shù)的不斷提升,相信未來會(huì)有更多更迅速的方法產(chǎn)生蛋白。