傳統(tǒng)的抗體制備方式就是通過抗原來(lái)刺激動(dòng)物,讓其產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)。然后再通過提取血清或提取脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞結(jié)合來(lái)產(chǎn)生抗體??偟膩?lái)說,抗體制備過程中的任何一個(gè)過程都可能會(huì)影響到抗體質(zhì)量的好壞,所以,想要獲得優(yōu)質(zhì)蛋白,就必須做好任何一個(gè)細(xì)節(jié)問題。作為抗體制備的第一步,動(dòng)怒免疫是直接制約著抗體質(zhì)量好壞的基礎(chǔ)。那么,如何做好動(dòng)物免疫呢?
所謂的動(dòng)物免疫,其實(shí)就是生物體自身體液針對(duì)抗原所產(chǎn)生的一種免疫應(yīng)答機(jī)制,通過抗原對(duì)機(jī)體的持續(xù)性刺激,讓其先后啟動(dòng)初次免疫反應(yīng)和次級(jí)免疫反應(yīng),然后通過對(duì)血清中的蛋白含量來(lái)進(jìn)行判斷免疫效果。一般來(lái)說,初次免疫會(huì)有一定的滯后期,而此次免疫則不會(huì),而且啟動(dòng)更快,強(qiáng)度更大,同時(shí)分泌的抗體經(jīng)過親和力成熟和亞型轉(zhuǎn)換,質(zhì)量更佳。
那么,還有什么其他需要注意的嗎?
1、動(dòng)物選擇。盡量選擇健康的雄性動(dòng)物,而且在免疫過程中也要盡量保證無(wú)免疫病;
2、種屬差異選擇??乖c免疫動(dòng)物種屬差異盡量越遠(yuǎn)越好,如果太近,抗原可能無(wú)法識(shí)別;
3、免疫劑量調(diào)整。針對(duì)選用動(dòng)物不同,需要對(duì)劑量及間隔時(shí)間鍵調(diào)整,大動(dòng)物約0.5~1mg/只,小動(dòng)物約0.1~0.6mg/只,當(dāng)然了,這個(gè)量也可以根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整;
4、注射途徑選擇。注射的途徑有很多種,足掌、肘窩、頸部等,最廣泛使用的是皮下注射方式,當(dāng)然了,針對(duì)不同的情況,也可以進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;
5、免疫時(shí)間間隔。免疫時(shí)間的間隔也是一個(gè)重要因素,特別是首次和第二次之間。首次免疫后需要間隔10-20天,之后的間隔在7-10天,這個(gè)時(shí)間不能太長(zhǎng),可能會(huì)造成刺激變?nèi)鯇?dǎo)致抗體效價(jià)不高。一般來(lái)說,免疫5輪以上最好;
雖然說動(dòng)物免疫看起來(lái)好像沒人特別拿過來(lái)說,但是它卻直接制約著抗體制備成功與否的關(guān)鍵,只有做好了這方面的工作,才能更好地進(jìn)行后期的操作。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。
本文網(wǎng)址:http://dssoundlabs.com/archive/594.html,轉(zhuǎn)載請(qǐng)標(biāo)明出處,謝謝!