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盤點重組蛋白表達(dá)中的幾種常見形式

發(fā)表時間:2024-01-24 訪問次數(shù):722

  重組蛋白表達(dá)在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中起著重要的作用,能夠為我們在表達(dá)量以及表達(dá)質(zhì)量上帶來非常大的幫助。通常情況下,重組蛋白是通過將外源基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞內(nèi),隨著細(xì)胞蛋白的表達(dá)而表達(dá)。目前,重組蛋白表達(dá)主要通過五大表達(dá)系統(tǒng)來實現(xiàn)表達(dá)和純化。

重組蛋白表達(dá)

  什么是重組蛋白表達(dá)?

  重組蛋白表達(dá)是利用DNA重組技術(shù),將目標(biāo)基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞中,通過宿主的生物機制表達(dá)出所需蛋白。通過基因克隆,將基因擴增后形成重組質(zhì)粒,將質(zhì)粒導(dǎo)入到宿主細(xì)胞中(使用化學(xué)方法、電穿孔或者嗜熱菌等方法進行轉(zhuǎn)染),而后將細(xì)胞進行目的蛋白表達(dá);

  重組蛋白表達(dá)有哪幾種類型呢?

  1、融合表達(dá)

  通過將目的蛋白基因序列構(gòu)建到表達(dá)載體中,由相同的調(diào)控原件進行融合表達(dá);

  2、非融合表達(dá)

  這個方法與融合表達(dá)相對,所得目的蛋白不與任何蛋白標(biāo)簽進行融合表達(dá),不過這個方法會因為宿主中的蛋白酶而降解,從而失去活性;

  3、胞內(nèi)表達(dá)

  就重組蛋白表達(dá)而言,大多數(shù)的目的蛋白都以胞內(nèi)表達(dá)實現(xiàn),當(dāng)然了,有些時候,在胞內(nèi)表達(dá)時,會因為細(xì)胞內(nèi)部的原因?qū)е碌鞍捉Y(jié)構(gòu)發(fā)生影響。這個時候,我們就需要借助分泌信號肽等蛋白標(biāo)簽來實現(xiàn)表達(dá);

  4、分泌表達(dá)

  所謂的分泌表達(dá)也就是我們常說的胞外表達(dá),這種表達(dá)方式更適合于蛋白的純化,也比較穩(wěn)定不易降解;

  當(dāng)然了,就溶解性而言,重組蛋白表達(dá)也可以分為可溶性表達(dá)和非可溶性表達(dá),也就是我們常說的是否會形成包涵體。雖然說現(xiàn)階段的重組蛋白表達(dá)技術(shù)存在著一定的不足之處,但是,其所能帶來的好處是不言而喻的。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白表達(dá)服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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