SPR(Surface plasmon resonance)也被稱為表面等離子體共振,就本質(zhì)上來說,是一種物理光學(xué)現(xiàn)象。SPR技術(shù)可用于進(jìn)行分子間特異性結(jié)合的分析、濃度定量、結(jié)合動力學(xué)、親和力分析等,使用范圍非常的廣泛。
在SPR親和力檢測時(shí),有很多問題需要引起注意,這樣才能在更大程度上保障實(shí)驗(yàn)的精準(zhǔn)。下面,普健生物和大家盤點(diǎn)這些問題。
1、如果為病毒樣本,需要進(jìn)行儀器消毒嗎?
無論使用的是不是病毒樣本,在每次檢測完成后,都需要對一起進(jìn)行清洗,清除管道中殘留的樣品,盡可能清洗除菌,以防止管道中微生物可能對儀器造成的損壞;
2、進(jìn)行親和力分析的時(shí)候,一般選擇哪種緩沖液?
親和力檢測時(shí)我們通常采用的緩沖液為PBS或HBS。當(dāng)然了,對于一些特殊的檢測需求來說,需要搭配特定的緩沖液;
3、如果樣本為小分子化合物,可以做親和力檢測嗎?
小分子化合物(ATAGENIX)一般來說可以做親和力檢測,但是常常需要根據(jù)小分子本身的溶解性來進(jìn)行判斷,如果溶解度低,需要加入DMSO來促進(jìn)溶解;
4、檢測過程中出現(xiàn)非特異性結(jié)合,需要如何解決?
當(dāng)抗原和抗體發(fā)生非特異性結(jié)合時(shí),我們需要對樣品離心后放棄上清液,加入PBS清洗三次后,過濾掉聚集的細(xì)胞,而后加入醋酸鈉,并將其稀釋到合適的細(xì)胞密度;
5、如何進(jìn)行表位分析?
選擇配對檢測,通過在芯片表面固定一種抗體,并將抗原結(jié)合到抗體上,在其經(jīng)過第二種抗體時(shí),看其是否能夠結(jié)合到抗原上;
6、SPR和BLI的優(yōu)缺點(diǎn)各有哪些?
SPR和BLI在親和力檢測中各具優(yōu)勢,兩種方法都可以獲得精準(zhǔn)的數(shù)值和相關(guān)動力學(xué)數(shù)據(jù)。當(dāng)然了,SPR比BLI擁有更長的歷史,在靈敏度上更具優(yōu)勢,在分辨方面更勝一籌。只是SPR需要更多的儀器維護(hù),且實(shí)驗(yàn)樣品不可回收;
親和力檢測作為現(xiàn)階段常用的親和力檢測手段,無論在理論研究和還是臨床實(shí)驗(yàn)上,都有著廣泛的應(yīng)用。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供SPR親和力檢測服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。