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昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)蛋白和純化的優(yōu)勢盤點(diǎn)

發(fā)表時(shí)間:2024-03-15 訪問次數(shù):1029

  昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)是目前最常用的五大蛋白表達(dá)系統(tǒng)之一(哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)、桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)、枯草芽孢桿菌表達(dá)系統(tǒng))。其原理是通過用桿狀病毒去感染昆蟲細(xì)胞來表達(dá)蛋白的方式。那么,相比其他蛋白表達(dá)系統(tǒng)來說,昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢體現(xiàn)在哪些方面呢?

桿狀病毒昆蟲表達(dá)系統(tǒng)

  昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)勢:

  1、操作簡單。桿狀病毒的基因組較小,分子生物學(xué)特性簡單,相比其他表達(dá)系統(tǒng)來說,操作更加簡單;

  2、安全性高。桿狀病毒的安全性好,蛋白表達(dá)中無需進(jìn)行額外操作;

  3、外源基因攜帶量大。可以加入各種外源基因;

  4、可折疊與修飾。能夠進(jìn)行正確的折疊以及翻譯后修飾性操作;

  昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)步驟:

  1、載體構(gòu)建。將目標(biāo)基因插入到桿狀病毒中,通常采用線性或環(huán)狀的DNA質(zhì)粒;

  2、細(xì)胞轉(zhuǎn)染。將構(gòu)建好的表達(dá)載體利用桿狀病毒轉(zhuǎn)染到昆蟲細(xì)胞中,使得目標(biāo)基因合理插入到細(xì)胞染色體中;

  3、蛋白表達(dá)。通過對(duì)細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增,而后實(shí)現(xiàn)目的蛋白在宿主細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄和表達(dá),以達(dá)到目標(biāo)蛋白的大量表達(dá);

  4、蛋白檢測及純化。對(duì)目的蛋白的特異性和親和力進(jìn)行檢測,如果檢測目的蛋白符合需求,則對(duì)蛋白進(jìn)行純化;

  在昆蟲桿狀病毒表達(dá)時(shí),我們盡量去選擇合適的表達(dá)載體,對(duì)轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化,并設(shè)計(jì)好實(shí)驗(yàn)的步驟,這樣才能在更大程度上保障蛋白的表達(dá)。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達(dá)服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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