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有關(guān)鼠單克隆抗體制備的詳細(xì)過(guò)程

發(fā)表時(shí)間:2022-09-28 訪問(wèn)次數(shù):3251

  自從雜交瘤細(xì)胞技術(shù)被建立以來(lái),這種既能分泌抗體,又能無(wú)限增殖的雜交融合細(xì)胞技術(shù)就得到了廣泛的使用。它能大量產(chǎn)生同一種抗體,而且是針對(duì)同一抗原的高度同質(zhì)化的抗體,這種抗體我們稱(chēng)之為單克隆抗體(單抗,monoclonal antibody)。下面,普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)鼠單克隆抗體制備的詳細(xì)過(guò)程。

  基本過(guò)程如下:

  1、將抗原注入小鼠體內(nèi);

  2、培養(yǎng)小鼠一定時(shí)間;

  3、獲取小鼠脾臟,獲得脾細(xì)胞;

  4、通過(guò)雜交瘤技術(shù),將其B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得雜交瘤細(xì)胞(不僅具備B細(xì)胞特性,同時(shí)可以無(wú)限增殖);

  5、篩選出優(yōu)質(zhì)的雜交瘤細(xì)胞;

  6、對(duì)篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行鑒定和克隆(也就是我們常說(shuō)的雜交瘤細(xì)胞株);

  目前雜交瘤技術(shù)的使用變得越發(fā)的廣泛,還有更多的潛力等待我們開(kāi)發(fā)。相對(duì)于抗血清來(lái)說(shuō),能減少大量動(dòng)物和費(fèi)用。而且其純度高,均一性好,更適合藥物生產(chǎn)和臨床使用。

  獲得雜交瘤細(xì)胞株后,我們通常會(huì)通過(guò)如下兩個(gè)方法來(lái)產(chǎn)生單克隆抗體。

  1、小鼠腹水。將雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠腹腔內(nèi),在獲得腹水的同時(shí),可以通過(guò)純化獲得抗體。這個(gè)方法操作相對(duì)簡(jiǎn)單,花費(fèi)較少,重復(fù)性高,但是傷害動(dòng)物,如果需要實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn),則需要使用到大量的小鼠;

  2、細(xì)胞培養(yǎng)。直接培養(yǎng)雜交瘤,提取其上清液中的抗體。這個(gè)方法適合大規(guī)模生產(chǎn),只是獲得的抗體所包含的雜質(zhì)較多,可能會(huì)產(chǎn)生一些影響到當(dāng)體純度的雜蛋白;

  如上,便是有關(guān)鼠單克隆抗體生產(chǎn)的全部過(guò)程,可以說(shuō),如上的方法都存在著一定的局限性,純度高的方法對(duì)動(dòng)物傷害較大,大規(guī)模生產(chǎn)的方法則含雜質(zhì)較多。所以,我們?cè)谌粘?shí)驗(yàn)中,需要結(jié)合自己的實(shí)際來(lái)選擇合適的方法,以滿足我們單克隆抗體生產(chǎn)的需求。更多鼠單抗生產(chǎn)的知識(shí),敬請(qǐng)關(guān)注普健生物。

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