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盤點(diǎn)雜交瘤細(xì)胞技術(shù)制備單克隆抗體會遇到的問題

發(fā)表時(shí)間:2023-10-20 訪問次數(shù):729

  雜交瘤細(xì)胞制備抗體技術(shù)相信大家都不覺得陌生了,它就是一種將免疫后的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后產(chǎn)生單克隆抗體的傳統(tǒng)方法。如果想了解雜交瘤相關(guān)的具體知識,可以點(diǎn)擊“什么是雜交瘤測序?它的操作流程是怎樣的?”查看。今天,普健生物在這里簡單和大家介紹一下有關(guān)雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)常見的一些問題。

  一、微生物污染

  1、細(xì)菌和真菌污染一般都是因?yàn)椴僮鞑划?dāng)所導(dǎo)致,除了實(shí)驗(yàn)之前做好日常消殺外,還需要確保消毒劑的純度及質(zhì)量;

  2、支原體污染則可能是因?yàn)檠逯破芬约跋嚓P(guān)實(shí)驗(yàn)材料污染所導(dǎo)致,一般來說,短期污染沒什么明顯變化,但是時(shí)間長了之后可能會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢。所以,在購買相關(guān)產(chǎn)品的時(shí)候,要盡量保證相關(guān)產(chǎn)品的純度,減少不必要的麻煩;

  3、原聲生物污染常見的主要為黑膠蟲,污染后會出現(xiàn)一些小黑點(diǎn);

  二、細(xì)胞不生長

  1、最常見的原因是因?yàn)槿诤显噭┯卸?,需要進(jìn)行替換;

  2、使用的血清質(zhì)量很差,可以優(yōu)先考慮胎牛血清;

  3、添加劑比例不正常;

  三、細(xì)胞不分泌抗體

  1、細(xì)胞直接不分泌抗體一般來說主要是因?yàn)榭乖庖咝圆钏鶎?dǎo)致,脾臟損傷嚴(yán)重等;

  2、后期分泌抗體越來越少主要因?yàn)楣撬枇龇敝潮灰种?、克隆不及時(shí)以及染色體丟失等情況導(dǎo)致;

  四、細(xì)胞克隆困難

  1、對已有雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選;

  2、在培養(yǎng)基中加入IL-6;

  其實(shí)大家不難看出,導(dǎo)致雜交瘤細(xì)胞制備抗體困難或失敗的原因主要是因?yàn)榧?xì)節(jié)方面的錯(cuò)誤操作導(dǎo)致。所以,我們在日??贵w制備時(shí),不僅要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)流程來,而且需要注意各個(gè)細(xì)節(jié)方面的問題。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤制備單克隆抗體服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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