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什么是大腸桿菌表達系統(tǒng)?它的優(yōu)勢體現(xiàn)在哪些方面?

發(fā)表時間:2022-11-14 訪問次數(shù):2266

  說到大腸桿菌表達系統(tǒng),相信大家都不會陌生,因為只要需要表達蛋白產(chǎn)品,第一個想到的,基本上就是大腸桿菌蛋白表達系統(tǒng)。大腸桿菌是第一種用來表達蛋白的細菌,因為大腸桿菌存在于生物腸道中,大部分菌株是無害的,所以使用最為廣泛。今天,普健生物就和大家具體聊聊大腸桿菌表達系統(tǒng)。

  大腸桿菌表達系統(tǒng)的組成:表達載體、外源基因及表達宿主菌

  1、表達載體

  一般來說,一個完整的質(zhì)粒表達系統(tǒng)需要具備復(fù)制起點、啟動子、目的基因、篩選標(biāo)記以及終止子;

  2、外源基因

  原核基因可以直接在大腸桿菌中實現(xiàn)表達,真核則需要注意(因為真核基因含有內(nèi)含子,不能對nRNA進行剪切,所以,只能用cRNA進行表達)。一般來說,蛋白在大腸桿菌中會呈現(xiàn)不溶性的包涵體顆粒以及可溶性的蛋白,我們需要根據(jù)具體情況進行具體的處理;

  3、表達宿主菌

  大腸桿菌蛋白表達最重要的就是宿主細胞的選擇,我們需要結(jié)合宿主細胞的特性以及蛋白的特性來進行選擇。一般選擇濃度高、成本低、不致病不產(chǎn)生內(nèi)毒素、發(fā)熱量低需氧量小等方面的宿主;

  大腸桿菌的優(yōu)勢以及不足之處:

  因為是最早用來表達蛋白的宿主,所以,人們對大腸桿菌的研究非常透徹,所以其表達背景清楚、表達水平高、操作簡單、培養(yǎng)周期短、抗污染能力強等優(yōu)勢非常的明顯。但是,也存在著一定的不足,比如不能進行翻譯后修飾,且含有大量的內(nèi)毒素。畢竟一種絕對完美的蛋白表達系統(tǒng)是不可能存在的,能夠滿足一定環(huán)境下的需求即可。

  大腸桿菌表達系統(tǒng)作為最開始用來表達蛋白的系統(tǒng),其存在的一些優(yōu)勢不是其他系統(tǒng)可以比擬的,雖然現(xiàn)階段發(fā)展出了很多表達系統(tǒng),但是其依然占據(jù)了一席之地。而且大腸桿菌表達系統(tǒng)也含有很多不同的表達宿主,能夠滿足各種不同的需求,而且生產(chǎn)成本低,是工業(yè)蛋白制備的主要選擇。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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