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什么雜交瘤抗體測(cè)序?它的服務(wù)內(nèi)容有哪些?

發(fā)表時(shí)間:2023-03-10 訪問次數(shù):1309

  雜交瘤抗體制備相信大家都不陌生,當(dāng)我們需要進(jìn)行單克隆抗體生產(chǎn)的時(shí)候都會(huì)使用都雜交瘤。但是我們知道,雜交瘤細(xì)胞在保存的過程中容易出現(xiàn)污染、基因丟失、細(xì)胞狀態(tài)比好等問題,在后期的使用中會(huì)嚴(yán)重影響到抗體的質(zhì)量。所以,一般情況下,我們都會(huì)進(jìn)行雜交瘤測(cè)序,以保證后期外源抗體的穩(wěn)定表達(dá)。

  什么是雜交瘤測(cè)序?

  雜交瘤測(cè)序的概念其實(shí)并不困難,主要是通過提取雜交瘤細(xì)胞中抗體基因序列,并對(duì)進(jìn)行相應(yīng)的測(cè)序工作,得到所需段卡尼的核苷酸序列。當(dāng)后期需要使用的時(shí)候,可以按照序列制備出相應(yīng)的mRNA,然后再根據(jù)mRNA反轉(zhuǎn)錄出mDNA,之后再進(jìn)行基因序列的重組蛋白表達(dá),最終獲得我們所需的抗體。

  雜交瘤測(cè)序服務(wù)的內(nèi)容具體有哪些呢?

  普健生物雜交瘤測(cè)序的過程主要分為五個(gè)階段,其中的一些階段會(huì)根據(jù)實(shí)際需求進(jìn)行增減。

  階段一:cDNA擴(kuò)增。通過細(xì)胞裂解,擴(kuò)增第一聯(lián)cDNA;

  階段二:抗體基因擴(kuò)增。對(duì)基因進(jìn)行預(yù)擴(kuò)增,并且分階段對(duì)基因進(jìn)行特異性擴(kuò)增;

  階段三:基因測(cè)序。將基因可控到載體中,而后進(jìn)行相關(guān)核酸序列的測(cè)定,并對(duì)其生物學(xué)信息進(jìn)行分析;

  階段四:抗體表達(dá)驗(yàn)證(可選)。通過測(cè)序所得基因及逆轉(zhuǎn)錄,制備質(zhì)粒,并對(duì)基因進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,并進(jìn)行相關(guān)抗體性質(zhì)檢測(cè);

  階段五:抗體表達(dá)及純化(可選)。對(duì)所得抗體進(jìn)行純化操作;

  總的來說,雜交瘤測(cè)序的意義非常重大,不僅能夠減少雜交瘤傳代過程中純?cè)诘牟环€(wěn)定因素,而且能夠避免因?yàn)榕尾煌膯栴}而造成的抗體性質(zhì)不同的現(xiàn)象。雜交瘤測(cè)序操作,能夠有效地避免這類情況的發(fā)生,通過重組蛋白表達(dá)的方式,獲得優(yōu)質(zhì)的抗體產(chǎn)品。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供雜交瘤測(cè)序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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