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單B細胞技術的工作流程是怎樣的?

發(fā)表時間:2023-09-13 訪問次數(shù):866

  單B細胞技術是現(xiàn)階段單克隆抗體制備的主要方法,其保留了輕重鏈可變區(qū)的天然配對,具備快捷、細胞數(shù)量少、高效等優(yōu)勢。單B細胞技術通過直接擴增單B細胞的VH和VL編碼基因,從而生產(chǎn)出高質量的單克隆抗體。那么,單B細胞技術的具體流程是怎樣的?

  1、單個B細胞分離

  從淋巴組織中分離出單B細胞,而后通過顯微操作、激光捕獲顯微切割以及熒光激活細胞分選等技術,中挑選出具備特異性的細胞;

  2、單B細胞抗體測序及克隆

  通常我們會采用96孔板進行單細胞的cDNA合成,而后通過相應的技術手段對其進行擴增。而后將表達載體轉染到哺乳動物細胞中,而后對單克隆抗體進行體外表達;

  3、抗體表達及篩選

  鑒定抗體片段的特異性和生物活性,而后將攜帶有目的抗體的表達載體在對應的表達載體中進行表達。

  其實大家不難看出,單B細胞技術開發(fā)和雜交瘤細胞抗體表達有著很多相似之處,只是在細胞制備最初階段有著一定的區(qū)別,之后的過程都非常的類似。作為現(xiàn)階段能夠制備高質量單克隆抗體的熱門方式,單B細胞技術將會得到進一步的開發(fā),活得更好的制備方式。普健生物專業(yè)為您提供單B細胞單克隆抗體制備服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。

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