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如何選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)?

發(fā)表時(shí)間:2024-01-15 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):817

  蛋白表達(dá)指的是生物體內(nèi)產(chǎn)生特定蛋白的過(guò)程,在生物制藥、基因工程以及結(jié)構(gòu)生物學(xué)等方面有著廣泛的應(yīng)用。為了獲得蛋白,已經(jīng)有了多種獲得途徑,滿(mǎn)足不同表達(dá)水平、折疊狀態(tài)等需求。就現(xiàn)階段而言,常見(jiàn)的蛋白表達(dá)系統(tǒng)主要有五種,今天你,普健生物在這里和大家具體聊聊。

  一、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)

  大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是最早用于蛋白表達(dá)的原核表達(dá)系統(tǒng)之一,因?yàn)檫z傳背景清晰、表達(dá)水平高、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn),使得其在很多場(chǎng)景都有著廣泛的使用;

  優(yōu)點(diǎn):表達(dá)速度快、成本低、適用于表達(dá)小到中等大小的蛋白;

  缺點(diǎn):無(wú)法糖基化,不適于表達(dá)復(fù)雜的蛋白;

  二、枯草芽孢桿菌表達(dá)系統(tǒng)

  枯草芽孢桿菌屬于原核表達(dá)系統(tǒng),適用于大型或復(fù)雜的蛋白表達(dá),且易于操作;

  優(yōu)點(diǎn):對(duì)于大型、復(fù)雜的蛋白表達(dá)效果較好,操作簡(jiǎn)單;

  缺點(diǎn):表達(dá)量相對(duì)較低;

  三、酵母表達(dá)系統(tǒng)

  一般采用釀酒酵母表達(dá),通過(guò)酵母在表達(dá)產(chǎn)物的加工、外分泌、翻譯后修飾以及糖基化等操作;

  優(yōu)點(diǎn):適用于較大、復(fù)雜的單標(biāo)表達(dá),同時(shí)能夠?qū)崿F(xiàn)一些真核細(xì)胞特有的后期修飾;

  缺點(diǎn):操作相對(duì)復(fù)雜、培養(yǎng)周期相對(duì)較長(zhǎng);

  四、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)

  通過(guò)將目標(biāo)蛋白基因克隆至哺乳細(xì)胞表達(dá)載體中,可以在載體中添加信號(hào)肽和純化標(biāo)簽,以滿(mǎn)足進(jìn)一步親和純化需求;

  優(yōu)點(diǎn):適用于生產(chǎn)高度復(fù)雜、大規(guī)模蛋白表達(dá),能夠?qū)崿F(xiàn)糖基化以及蛋白的正確折疊;

  缺點(diǎn):制備成本高、培養(yǎng)條件相對(duì)復(fù)雜、生產(chǎn)周期長(zhǎng);

  五、昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)

  利用桿狀病毒作為外源基因載體,感染昆蟲(chóng)細(xì)胞或昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)來(lái)表達(dá)目的蛋白的系統(tǒng);

  優(yōu)點(diǎn):表達(dá)速度相對(duì)較快、培養(yǎng)條件相對(duì)簡(jiǎn)單;

  缺點(diǎn):對(duì)于一些復(fù)雜的蛋白表達(dá)效果不如哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng);

  對(duì)于傳統(tǒng)五大蛋白表達(dá)系統(tǒng)來(lái)說(shuō),并不存在哪種表達(dá)系統(tǒng)更好,而是需要根據(jù)目標(biāo)蛋白的性質(zhì)、用途、需求等進(jìn)行合理選擇。而不同的表達(dá)系統(tǒng)也各具優(yōu)劣,需要結(jié)合需求來(lái)選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)。普健生物專(zhuān)業(yè)為廣大用戶(hù)提供蛋白表達(dá)服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢(xún)。

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