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有沒有什么辦法可以解決蛋白可溶性不高的問題?

發(fā)表時間:2023-05-19 訪問次數(shù):1114

  我們在進行蛋白表達時,往往會涉及到一個概念:蛋白可溶性。它的意思是說,蛋白可溶于溶液中的分量。我們知道,蛋白只有溶于溶液中時才會發(fā)生作用,析出的蛋白則無法發(fā)生反應(yīng),所以,蛋白的可溶性在極大程度上制約著蛋白的功能。那么,有沒有什么辦法來提升蛋白的可溶性呢?今天,普健生物就和大家具體聊聊。

  1、選擇可溶性更高的工程菌

  蛋白是否可溶,在很大程度上取決于其二硫鍵以及是否能夠正確折疊的問題。所以,我們可以選擇那些有利于二硫鍵形成的宿主菌,這樣更有利于蛋白的表達;

  2、添加一些促溶的標簽

  根據(jù)蛋白的特性,有意識地加入一些能夠促進蛋白可溶性的標簽;

  3、伴侶表達

  在進行工程菌表達時,可以同時加入一個能夠表達伴侶蛋白的質(zhì)粒,這個伴侶蛋白不能與表達外源蛋白的質(zhì)粒出現(xiàn)質(zhì)粒不相容的情況。然后,在結(jié)合實際情況來確定表達伴侶蛋白的質(zhì)粒;

  4、選擇合適的啟動子

  蛋白可溶性的強弱也和啟動子的選擇有著極大的關(guān)系,強啟動子不僅能提升蛋白產(chǎn)量,同時也增強了包涵體的形成,從而提升蛋白的可溶性;

  5、優(yōu)化蛋白的培養(yǎng)條件

  通過優(yōu)化蛋白的表達環(huán)境,比如:誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)劑濃度、誘導(dǎo)時間等,同時還可以通過優(yōu)化培養(yǎng)基內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)等來提升蛋白的表達;

  對于不同的公司來說,提升表達蛋白可溶性方法有很多,而且各不相同,但是,這些方法都是在實驗過程中不斷總結(jié)所得,能夠應(yīng)對絕大部分蛋白表達的問題。自然了,蛋白表達經(jīng)驗越多的公司,其應(yīng)對蛋白表達問題的方法也越多,也越好。普健生物作為一家擁有10余年蛋白抗體定制表達經(jīng)驗的公司,專業(yè)為你聽蛋白表達服務(wù),如果您有需求,歡迎來電咨詢。

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