蛋白是生物體內(nèi)的重要成分，它參與生物學(xué)功能中的各種角色，無(wú)論是結(jié)構(gòu)支撐還是代謝調(diào)節(jié)，都有著它的身影。為了研究蛋白的特性，科學(xué)家們往往需要將所需蛋白從細(xì)胞內(nèi)提取出來(lái)，其中涉及到的操作可謂多種多樣。在這個(gè)過(guò)程中，也衍生出了各種專業(yè)名詞。就比如蛋白提取和蛋白純化，從字面意思上來(lái)說(shuō)都是講蛋白分離出來(lái)，但是，為什么又要用到兩個(gè)詞呢?今天，普健生物和大家具體聊聊。

　　蛋白提取和蛋白純化是同一個(gè)操作嗎?

　　不是的。蛋白提取的主要過(guò)程是將蛋白從細(xì)胞中分離出來(lái)，最后的操作可以看做是初步的純化操作，而蛋白純化則是提升混合液中蛋白濃度的一種方法。想要進(jìn)一步了解，我們只需要了解到蛋白的具體提取過(guò)程就行。

　　蛋白提取的過(guò)程是怎樣的?

　　1、細(xì)胞破碎。通過(guò)機(jī)械法(超聲波、攪拌等)、化學(xué)法(細(xì)胞壁酶等)方法將細(xì)胞進(jìn)行破碎，使得細(xì)胞內(nèi)的蛋白得以釋放;

　　2、離心。將破碎后的混合物進(jìn)行離心，去除底部的細(xì)胞壁和細(xì)胞核，從而獲得包含蛋白的上清液;

　　3、沉淀。通過(guò)添加鹽或是有機(jī)溶劑，使得其中的雜質(zhì)得以沉淀，而后在通過(guò)離心或過(guò)濾的方式來(lái)進(jìn)行收集;

　　4、萃取。通過(guò)固相吸附劑等物質(zhì)對(duì)所得蛋白進(jìn)行富集和分離;

　　蛋白純化的過(guò)程是怎樣的?

　　蛋白純化是將蛋白從蛋白提取后的溶液中分離出來(lái)的一種方法，通過(guò)這個(gè)操作，能夠極大程度上提升蛋白的濃度。具體純化方法，我們一般選擇如下幾種：

　　1、凝膠電泳。這個(gè)方法是按照蛋白的大小、電荷等性質(zhì)分離蛋白，通過(guò)凝膠電泳，將相關(guān)特性的蛋白分離出來(lái)，主要用作蛋白的分析以及預(yù)處理;

　　2、柱層析。主要原理是根據(jù)蛋白分子的大小、電荷、親和力等特性，將蛋白從雜質(zhì)中分離出來(lái)的方法;

　　3、親和純化。通過(guò)目標(biāo)蛋白的特異性分析，將其與具備相關(guān)特性的配體進(jìn)行親和性結(jié)合，將目標(biāo)蛋白吸附到某種固相材料上，而后再將其洗脫下來(lái)，以獲得目標(biāo)蛋白;

　　4、超濾法。采用一些超濾技術(shù)，將小分子雜質(zhì)從中過(guò)濾出去，從而獲得純度更高的蛋白;

　　其實(shí)大家不難看出，蛋白提取與蛋白純化其實(shí)就是蛋白制備中的兩個(gè)步驟，進(jìn)行蛋白提取之后，根據(jù)需求再進(jìn)行蛋白純化工作，以便于更好的對(duì)蛋白進(jìn)行應(yīng)用。蛋白制備其實(shí)是一個(gè)非常嚴(yán)謹(jǐn)且復(fù)雜的過(guò)程，需要注意好相關(guān)細(xì)節(jié)操作，才能更好的保證蛋白的表達(dá)。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達(dá)服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。