蛋白純化是一種常用于提升蛋白純度的方法,它能夠提升蛋白的特性,讓實驗更加成功。蛋白純化的方法有幾種,其中較為常用的就是親和層析法。在這里,普健生物和大家具體聊聊有關(guān)親和層析蛋白的原理及其優(yōu)缺點。
親和層析純化的步驟:
1、捕獲
通過速度和容量之間進行優(yōu)化組合,能夠讓產(chǎn)物能夠進行有效地分離、濃縮和穩(wěn)定化處理。如果樣品帶標(biāo)簽,可以選擇親和層析,如果不帶標(biāo)簽,可以考慮離子交換;
2、中度純化
這個過程主要用于將目標(biāo)和大體積的雜質(zhì)分開。在這個階段,速度不再是最重要的因素,一般考慮采用離子交換層析或疏水層析進行進一步樣品提純;
3、精細純化
在這個過程中,主要用于提升高分辨率。因為已經(jīng)去除了大部分的雜質(zhì),但是也可能造成一定的損失,這個時候,一般考慮使用高分辨率的分子篩或高分辨率的離子交換層析柱來進行純化;
親和層析的優(yōu)缺點:
1、這個方法非常有效,經(jīng)過一步步地手段,能夠提純蛋白質(zhì),然后將蛋白分離出來,而且純度非常的高;
2、這個方法能夠?qū)Ψ肿舆M行選擇化分離,能夠提升純化倍數(shù)。經(jīng)過純化后的蛋白性質(zhì)更加穩(wěn)定,能夠有效提升其活性回收率。而且能夠有效減少純化步驟,縮短純化時間;
3、但是,這個方法載體比較昂貴,機械強度低,而且所用配給需要首先進行純化,各種成本相對較高;
雖然說,蛋白純化的方法有好幾種,但是對于不同的使用環(huán)境來說,各個方法都有各自的優(yōu)勢。而且,隨著蛋白純化技術(shù)的不斷提升,相信未來能夠有更合適的方法來應(yīng)對各種不同的純化需求。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。