蛋白純化是蛋白制備過(guò)程中非常重要的一個(gè)步驟,它能夠?qū)⑺璧鞍讖娜芤褐刑崛〕鰜?lái),讓蛋白達(dá)到更大的效果?,F(xiàn)階段最常用的蛋白表達(dá)方式主要有親和色譜法、離子交換色譜法、尺寸排阻色譜法和疏水作用色譜法等,其中層析法是最常見的方法之一。那么,這些方法各有哪些優(yōu)缺點(diǎn)呢?
1、親和色譜法:
這個(gè)方法主要通過(guò)生物識(shí)別。其優(yōu)點(diǎn)是能夠一次性分離特定的蛋白,而且會(huì)收錄高,可以進(jìn)行快速分析力。但是需要蛋白具備較高的特異性,否則很難達(dá)到純化效果;
2、離子交換色譜法
這個(gè)方法主要通過(guò)生物電荷來(lái)進(jìn)行純化。其優(yōu)點(diǎn)是能夠高準(zhǔn)確度地進(jìn)行分離,同時(shí)具備高耐受性。但是柱間存在不一致性,會(huì)導(dǎo)致蛋白純化出現(xiàn)一定的問題;
3、尺寸排阻色譜法
這個(gè)方法主要通過(guò)分子大小進(jìn)行純化。其優(yōu)點(diǎn)在于蛋白回收率高,更是能夠明確分離的時(shí)間。但是MW的需求存在一定的差異性;
4、疏水作用色譜法
這個(gè)方法主要通過(guò)蛋白的疏水性進(jìn)行純化。其優(yōu)點(diǎn)在于其選擇性高,而且其條件非變,操作相對(duì)更加溫和。但是其相互作用較強(qiáng),容易造成蛋白不純的情況;
當(dāng)然了,蛋白純化還有很多其他方法,但是大體上都和如上的方法有一定的關(guān)系。雖然說(shuō)各種方法各具優(yōu)勢(shì),但是對(duì)于不同的使用環(huán)境來(lái)說(shuō),都有合適的方法來(lái)進(jìn)行蛋白純化。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。