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蛋白純化實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)沉淀的原因分析

發(fā)表時間:2023-02-20 訪問次數(shù):3836

  在蛋白制備實(shí)驗(yàn)過程中,蛋白純化可以說是一個非常重要的問題,只有將蛋白純化到一定濃度后,蛋白的作用才會更強(qiáng),實(shí)驗(yàn)的才能更好達(dá)到我們想要的效果。但是,在實(shí)驗(yàn)中我們常常會遇到各種各樣的問題,比如蛋白沉淀,就是非常常見的問題之一。那么,到底是什么原因?qū)е碌鞍壮恋淼哪?今天普健生物就和大家具體分析分析。

  如果完全按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計過程而來的話,一般都不會出現(xiàn)沉淀的情況,如果發(fā)生沉淀,那么就一定是外部環(huán)境發(fā)生了變化。

  1、PH值變化。理論上來說,蛋白有一個等電點(diǎn),當(dāng)PH值在蛋白等電點(diǎn)附近的時候,就會出現(xiàn)蛋白沉淀的現(xiàn)象;

  2、濃度過高。日常實(shí)驗(yàn)中,我們配置的溶液環(huán)境不一定符合蛋白的生存環(huán)境,除了溫度和PH值外,最主要的就是鹽離子濃度。如果鹽離子濃度過高的話,就會出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象,最終造成蛋白沉淀;

  3、重金屬脫落。在對蛋白進(jìn)行Ni純化處理時,其中的一些鎳離子會脫落,而這些脫落的重金屬則會造成蛋白的沉積,最終造成沉淀現(xiàn)象;

  4、凍融次數(shù)過多。對蛋白進(jìn)行反復(fù)凍融會在一定程度上傷害蛋白,對離子和緩沖液造成影響;

  5、滋生細(xì)菌。如果將蛋白長時間放置在4度的環(huán)境下,則容易滋生細(xì)菌,自然會造成蛋白沉淀;

  總的來說,造成蛋白的原因都是一些細(xì)節(jié)方面的操作問題,如果我們在實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟,并且時刻關(guān)注溶液的PH值、溫度、濃度,同時盡量做到盡快使用,避免反復(fù)凍融,這樣,就能從根本上減少蛋白純化中沉淀情況的發(fā)生。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。