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盤點常見的幾種穩(wěn)定細胞株的構建方法

發(fā)表時間:2023-03-23 訪問次數(shù):1002

  前面我們和大家聊過有關穩(wěn)定細胞株的構建原理及方法,如果沒有看過,您可以點擊“穩(wěn)轉細胞株的構建-構建原理及其構建方法盤點”進行查看。但是因為篇幅所限,上次沒能聊到有關穩(wěn)定細胞株的構建方法。所以,今天普健生物在這里就和大家具體聊聊有關穩(wěn)定細胞株構建的幾個常用方法及其適用范圍。

  穩(wěn)定細胞株的構建方法主要有三種:

  1、單克隆環(huán)法。這個方法多用于針對哪些整合率低卻有需要獲得單克隆株的方法。不過相比其他方法來說,這個方法的工作量相對較小,只需將轉染后的細胞按照一定的密度轉移到新的細胞皿中,然后采用藥物進行篩選,最后挑選出合適的單克隆細胞株即可。但是也正因為操作過于見到,導致其中容易出現(xiàn)所產(chǎn)生的細胞株不純,最終失去生長上的優(yōu)勢,導致失去穩(wěn)定細胞株;

  2、96孔單克隆稀釋法。這個方法同樣適用于整合率低的轉染或需要得到但隔開了細胞株的實驗。從理論上來說,這個方法能夠得到非常單一的單克隆抗體,同時可以篩選出懸浮穩(wěn)定細胞株。只不過因為過程繁瑣,所以工作量相對要大一些;

  3、逆轉錄病毒混合克隆制備法。如果需要制備混合穩(wěn)定株,這個方法就顯得非常的合適了。這個不僅能讓我們在短時間內(nèi)獲得穩(wěn)定細胞株,而且能夠將所得細胞稀釋液轉移到新的器皿中,最終獲得單克隆細胞株。只不過這個方法需要進行逆轉錄,相對來說,技術更加復雜,需要技術人員具備一定的實力才行;

  當然了,隨著技術的發(fā)展,有更多的方法被設計出來,能夠應對各種不同的使用場景需求。所以,在后來,我們完全可以選擇一種成本更低工作量更小技術需求更低的方式。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細胞株構建服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。