在進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建時，為了將目的蛋白基因載入到宿主細(xì)胞中，我們都會選擇通過轉(zhuǎn)染的方式來實(shí)現(xiàn)。可以說，轉(zhuǎn)染的成功與否，直接關(guān)系到目的蛋白表達(dá)的結(jié)果。那么，我們在進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株細(xì)胞轉(zhuǎn)染時，有沒有什么辦法提升其轉(zhuǎn)染效率，起到事半功倍的效果呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　我們知道，常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法主要有三種，分別是生物轉(zhuǎn)染、物理轉(zhuǎn)染以及化學(xué)轉(zhuǎn)染。

　　生物轉(zhuǎn)染：其實(shí)就是通過病毒感染的方式，將目標(biāo)蛋白DNA整合到宿主細(xì)胞中去;

　　物理轉(zhuǎn)染：通過電穿孔、細(xì)胞注射等方法，直接將目的蛋白DNA注入到宿主細(xì)胞中去(不過容易造成細(xì)胞死亡);

　　化學(xué)轉(zhuǎn)染：利用陽離子與陰離子核酸結(jié)合的特性，使得兩者相互吸引，從而實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染;

　　從上面的描述我們不難看出，對于不同的轉(zhuǎn)染方法，其有著不同的優(yōu)勢和劣勢，其轉(zhuǎn)染效率主要和如下幾個方面有關(guān)：

　　1、細(xì)胞活力。轉(zhuǎn)染成功率和細(xì)胞活性有著極大的關(guān)系，自然是活力越強(qiáng)，轉(zhuǎn)染的成功率就越高，而且和細(xì)胞類型也有著一定的關(guān)系;

　　2、細(xì)胞融合度。融合度越高，能夠在一定程度上提升細(xì)胞轉(zhuǎn)染的接受程度;

　　3、核酸類型。簡單核酸類型轉(zhuǎn)染成功率更高，反之越是復(fù)雜，成功率相對月低;

　　4、轉(zhuǎn)染方法。對于不同類型的細(xì)胞選擇不同類型的轉(zhuǎn)染方法其成功率存在著極大的不同;

　　所以，想要提升穩(wěn)定細(xì)胞株細(xì)胞轉(zhuǎn)染的目的，我們可以從如下幾個方面入手：

　　1、選擇活性高的細(xì)胞。盡量選擇那些細(xì)胞活性高的細(xì)胞，避免選擇活性低的細(xì)胞;

　　2、提升核酸純度。細(xì)胞轉(zhuǎn)染時需要保證目的DNA與RNA盡可能同質(zhì)，確保每個步驟不收RNA酶的影響;

　　3、合適的細(xì)胞密度。需要控制好細(xì)胞密度，過高或過低都會造成轉(zhuǎn)染效率變低;

　　4、選擇合適的轉(zhuǎn)染方法。根據(jù)細(xì)胞的類型選擇合適的轉(zhuǎn)染方法，不要一直使用單個轉(zhuǎn)染方法;

　　總的來說，我們在穩(wěn)定細(xì)胞株細(xì)胞轉(zhuǎn)染時，需要結(jié)合細(xì)胞類型及其細(xì)胞活性來進(jìn)行方法選擇，在轉(zhuǎn)染過程中需要注意到各類細(xì)節(jié)問題，只有這樣，才能更好地保證實(shí)驗(yàn)的成功。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。